ПЦР диагностика

   Метод полимеразной цепной реакции (сокращенно ПЦР) – это на сегодняшний день самый быстрый и точный метод исследования для определения многих заболеваний в микробиологии. С помощью ПЦР диагностики можно обнаружить инфекционных возбудителей в тех случаях, когда другие методы, такие как иммунологический, бактериологический, микроскопический бессильны.

   ПЦР диагностика является высокоточным методом, благодаря тому, что при исследовании материала определяется уникальный фрагмент РНК или ДНК, который характерен именно для данного возбудителя инфекции, что является свидетельством о наличии его в организме.

   ПЦР диагностика включает в себя 3 основные процедуры: подготовку пробы материала для исследования ( которая включает в себя выделение РНК или ДНК), полимеразную цепную реакцию и детекцию продукта ПЦР. При этой процедуре в пробирке происходит многократное копирование чужеродного генетического материала с помощью ДНК полимеразы, а потом миллионы копий уникальных фрагментов ДНК уже регистрируются визуально.

   Возбудители, имеющие высокую антигенную изменчивость и паразитирующие внутри клетки, единичные клетки бактерий и вирусов обнаруживаются с помощью метода ПЦР диагностики. Необходимо отметить, что другие методы при этом обычно бессильны. ПЦР диагностика уникальна ещё и потому, что позволяет выявить ДНК инфекционных возбудителей независимо от того откуда взята биологическая ткань. Это может быть соскоб эпителиальных клеток, кровь, мокрота, моча, слизь. Возбудители с чужеродной ДНК, находящиеся в исследуемом материале, будут обязательно выявлены.

   Классический метод выращивания в лаборатории клеток инфекционных возбудителей, которые передаются половым путем (гонорея, хламидиоза, гарднереллеза, уреаплазмоза, микоплазменная инфекциия) является малоэффективным, поэтому ПЦР диагностика здесь просто не заменима. При диагностике можно исследовать канал шейки матки или соскоб эпителия уретры, а также мочу, секрет простаты (если необходимо можно взять и другой материал). И получить точную информацию именно о конкретной инфекции благодаря тому, что размножению подвергается не сама бактерия, а её ДНК. При диагностике ВИЧ и врожденной ВИЧ инфекции также эффективен метод ПЦР диагностики.

   При помощи ПЦР диагностики возможно проведение генетической дактилоскопии, пренатальной диагностики. Своевременное выявление поврежденной ДНК с помощью ПЦР диагностики способствует решению проблемы при болезнях, которые передаются наследственным путем, это передаваемая по поколениям предрасположенность к определенным видам онкологии, детской инвалидности, детской смертности.

   Однако метод ПЦР диагностики не всегда применяется при дифференциальной диагностике бактериальных и вирусных пневмоний, дифтерии, туберкулеза, для выявления онковирусов и цитомегаловирусной инфекции, а также при определении в гастроэнтерологии геликобактериоза. Быстрота ПЦР диагностики определяется тем, что процесс проведения диагностирования автоматизирован и стандартизирован вплоть до подготовки пробы для выделения ДНК из вируса или бактерии. Это кстати, сводит к минимуму вероятность ошибки, связанной с ручной подготовкой проб и их тестированием.

   При проведении ПЦР диагностики возможно получение и ложно - положительных результатов. Необходимо учитывать, что этот метод высокоспецифичен и требует тщательности при проведении. Ложный результат может быть получен при попадании в материал исследования чужой нуклеиновой кислоты или её копий через реагенты или предметы.